硼酸亲和层析介质
纳微推出***硼酸亲和填料,它是利用硼酸与顺式二羟基化合物之间的共价配位作用实现分离纯化。在碱性条件下,硼
酸基团能与顺式二羟基结构作用,生成稳定的五元环络合物,分子被介质吸附;在酸性条件下络合被打开,分子从介质上解吸
附。硼酸亲和层析介质可以用于含有顺式二羟基化合物的分离纯化,东曹TOYOPEARL 尺寸排阻填料哪家好,如糖蛋白、核苷、核苷酸、糖类等的分离纯化。
选择层析方法
用分离范围宽广的凝胶过滤介质如Superose, Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份
用含专一配体或的亲和层析介质结合目标蛋白,分子尺寸排阻填料哪家好,一步即可得到高纯度样品;亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质
体积大的样品,东曹TOYOPEARL 尺寸排阻填料哪家好,往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化;高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化
疏水层析用高盐吸附,低盐洗脱的原理,洗脱的样品又可直接上离子交换介质;两种方法常被交替使用
离子交换层析中,为什么用氯离子洗脱阴离子
阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质(如DNA).这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子(一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠)洗脱挂柱样品时,尺寸排阻填料哪家好,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分开.
阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.
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